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丙型肝炎病毒核心抗原检测的临床诊断价值

2010-03-08365必发娱乐:本站 阅读: 【字号:
导读: 丙型肝炎是严重威胁人类健康的传染病之一,由于至今尚无预防疫苗问世,也没有特效药物治疗,因此早期诊断是防止丙型肝炎病毒(hepatitis C viral,HCV)传播的有效手段。临床上主要*实验室诊断来辅助诊断HCV感染,了解患者体内HCV复制的情况,常用的有丙型肝炎病毒抗体(HCV

   丙型肝炎是严重威胁人类健康的传染病之一,由于至今尚无预防疫苗问世,也没有特效药物治疗,因此早期诊断是防止丙型肝炎病毒(hepatitis C viral,HCV)传播的有效手段。临床上主要*实验室诊断来辅助诊断HCV感染,了解患者体内HCV复制的情况,常用的有丙型肝炎病毒抗体(HCVAb)和HCV RNA。但是,HCVAb产生有一个明显的窗口期,早期感染容易漏检,对感染恢复后样品产生误判,而且由于不同厂商的试剂包被的HCV抗原片段有所不同,导致检测结果缺乏可比性,故难以对感染后的进程及转归提供依据。PCR检测HCV RNA灵敏度高,但影响因素也多,实验室条件要求严格,且检测费用昂贵。据文献报道[1-4],HCV核心抗原阳性样品HCV RNA阳性率为85%以上,两者同步消长,具有极高的相关性。HCV抗原检测能够缩短HCV检测窗口期,近几年对这方面的报道陆续增多,具有可行性和较广泛的应用基础。本研究采用ELISA方法检测丙型肝炎病毒抗原(HCVAg),对其临床应用价值进行评价。

  1  资料与方法

  1.1  标本来源  选取2006年11~12月我院住院及门诊患者血清样本91份,其中男44份,女47份;年龄13~79岁,平均年龄47.7岁。所有病例选择均符合2000年中华医学会传染病与寄生虫病学分会指定的《病毒性肝炎防治方案》中的诊断标准[5],并排除合并感染其他病毒性肝炎,排除心、脑、肾、肺等器官疾病及高血压、糖尿病等。

  1.2  标本检测

  1.2.1  ELISA检测的简要步骤:取样本血清100 μl,加预处理液50 μl,56℃水浴30 min。酶标板每孔加入100 μl样品稀释液(包括空白,阴、阳对照孔,空白孔需加入200 μl样品稀释液);加入100 μl阴、阳对照孔于相应孔,其余孔各加入100 μl经预处理后的待测样品;37℃水浴振荡60 min。洗板6次。每孔加200 μl酶结合物,37℃水浴30 min,再洗板。最后显色剂A、B液各100 μl,37℃水浴避光显色10 min后加50 μl终止液。反应终止10 min内,以酶标仪450 nm波长测定各孔OD值。  
  临界值(cut off)确定:阳性对照每孔OD值>0.6,阴性对照孔OD值<0.1时,测定结果有效,其临界值(cut off)为:阴性对照孔平均OD值+0.06。   
  结果判定:待检测样品的OD值>临界值判定为HCV抗原阳性,<临界值判定为HCV抗原阴性。

  1.2.2  每份血清同时用ELISA法检测抗HCV,检测试剂由上海科华试剂公司提供。

  1.2.3  每份血清用ABI PRISM 7000PCR仪荧光定量逆转录聚合酶反应(PCR)检测HCV RNA含量,检测试剂由广州达安基因股份有限公司提供。

  1.2.4  每份血清用日本Olympus Au 2700全自动生化分析仪测定ALT浓度,检测试剂由第一化学药品株式会社提供。

  1.3  统计学分析  采用SAS 8.2统计软件进行统计学处理,计数资料比较采用进行χ2检验,P<0.05为差异有统计学意义。

(必发365娱乐:admin)

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