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微生物检验染色液的配制及染色方法

2010-04-02365必发娱乐:检验地带 阅读: 【字号:
导读: 1 美蓝染色法 1.1 吕氏碱性美蓝染色液美蓝 0.3g95%乙醇 30mL0.01%氢氧化钾溶液 100mL将美蓝溶解于乙醇中,然后与氢氧化钾溶液混合。 1.2 染色法将涂片在火焰上固定,待冷。滴加染液,染1~3min,水洗,待干,镜检。2.1.3 结果菌体呈蓝色。 2 革兰氏染色法 2.

1 美蓝染色法

1.1 吕氏碱性美蓝染色液美蓝 0.3g95%乙醇 30mL0.01%氢氧化钾溶液 100mL将美蓝溶解于乙醇中,然后与氢氧化钾溶液混合。

1.2 染色法将涂片在火焰上固定,待冷。滴加染液,染1~3min,水洗,待干,镜检。2.1.3 结果菌体呈蓝色。

2 革兰氏染色法

2.1 结晶紫染色液结晶紫 1g95%乙醇 20mL1%草酸铵水溶液 80mL将结晶紫溶解于乙醇中,然后与草酸铵溶液混合。

2.2 革兰氏碘液碘 1g碘化钾 2g蒸馏水 300mL将碘与碘化钾先进行混合,加入蒸馏水少许,充分振摇,待完全溶解后,再加蒸馏水至300mL。

2.3 沙黄复染液沙黄 0.25g95%乙醇 10mL蒸馏水 90mL将沙黄溶解于乙醇中,然后用蒸馏水稀释。

2.4 染色法

2.4.1 将涂片在火焰上固定,滴加结晶紫染色液,染1min,水洗。

2.4.2 滴加革兰氏碘液,作用1min,水洗。

2.4.3 滴加95%乙醇脱色,约30s;或将乙醇滴满整个涂片,立即倾去,再用乙醇滴满整个涂片,脱色10s。

2.4.4 水洗,滴加复染液,复染1min。水洗,待干,镜检。

2.5 结果革兰氏阳性菌呈紫色。革兰氏阴性菌呈红色。注:亦可用1:10稀释石炭酸复红染色液作复染液,复染时间仅需10s。

3 耐酸性染色法(萎-倪二氏法)

3.1 石炭酸品红染色液碱性品红 0.3g95%乙醇 10mL5%酚水溶液 90mL将品红溶解于乙醇中,然后与酚溶液混合。

3.2 3%盐酸-乙醇浓盐酸 3mL95%乙醇 97mL

3.3 复染液吕氏碱性美蓝染色液。

3.4 染色法

3.4.1 将涂片在火焰上加热固定,滴加石炭酸品红染色液,徐徐加热至有蒸气出现,但切 不可使沸腾。染液如因蒸发减少时,应随时添加。染5min,倾去染液,水洗。

3.4.2 滴加盐酸-乙醇脱色,直至无红色脱落为止(所需时间视涂片厚薄而定,一般为1~3min),水洗。

3.4.3 滴加吕氏碱性美蓝染色液,复染30s~1min,水洗,待干,镜检。

3.5 结果:耐酸性细菌呈红色,其他细菌、细胞等物质呈蓝色。

(必发365娱乐:admin)

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