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  • [分子生物学] DNA的损伤与修复 日期:2010-06-13 10:48:45 点击:1208 好评:6

    一、多种因素可引起DNA损伤 ㈠DNA自发性损伤 1 DNA复制产生误差 以DNA为模板按碱基配对进行DNA复制是一个严格而精确的事件,但也不是完全不发生错误的。 2 DNA的自发性化学变化 ㈡紫外线引起DNA损伤:易形成胸腺嘧啶二聚体(TT二聚体):在紫外线照射下,相...

  • [分子生物学] 细胞增生与凋亡 日期:2010-06-13 10:22:55 点击:144 好评:0

    1、细胞周期调控的关键分子是cyclin-Cdk复合物,其中cyclin(周期蛋白)是调节亚基,Cdk(周期蛋白依赖性激酶)是催化亚基,两者的结合使细胞调控有了最基本的发动机。但是要实现驱动细胞周期进程还需激活它们,复合物中Cdk的磷酸化与去磷酸化就是调节它们活...

  • [分子生物学] 基因的表达及调控 日期:2010-06-13 10:11:33 点击:410 好评:0

    基因的表达及调控 1基因(gene):是核酸分子中贮存遗传信息的遗传单位,是指贮存有功能的蛋白质多肽链或RNA序列信息及表达这些信息所必需的全部核苷酸序列。一个基因不仅仅包括编码蛋白质肽链或RNA的核酸序列,还包括保证转录所必需的调控序列及位于编码区5端...

  • [分子生物学] PCR检测的质量控制 日期:2010-06-09 23:34:06 点击:194 好评:2

    PCR检测质量的控制是一个系统工程,总体上涉及三个方面:一是试验仪器;二是试验试剂与耗材;三是人员操作。任何一个方面出现问题,都会影响PCR检测质量。 一、试验仪器 PCR仪和紫外凝胶成像系统(紫外分析仪或手提紫外等)以及移液器都可能影响PCR检测的质...

  • [分子生物学] 实时定量PCR应用中的问题及优化方案 日期:2010-06-02 19:09:03 点击:290 好评:0

    为了满足实时PCR更高敏感性要求,各试剂公司都致力于开发新型的化学发光材料,目前作为商业用途的这些化学物质都能适用于上述的各种仪器。它们主要有以下几种: 1. 水解探针或Taqman探针:这种探针用于Taqman分析法,它能被DNA合成酶(例如Taq酶)的53活性所降...

  • [分子生物学] 分子鉴别诊断领域的革命性技术—Tem-PCR 日期:2010-06-01 15:41:57 点击:456 好评:0

    分子鉴别诊断由于其高效、快速的特点,在公共卫生领域和个体化医疗中将发挥越来越重要的作用。分子鉴别诊断需要敏感、特异、可靠的多重扩增技术作为支撑,靶序列富集多重PCR( Tem—PCR ) 正是这样一项技术,能在一个反 应体系中同时对多种靶基因高度敏感和特...

  • [分子生物学] PCR扩增出现片状拖带或涂抹带原因及建议 日期:2010-05-29 14:40:24 点击:2600 好评:20

    PCR扩增出现片状拖带或涂抹带 原因 建议 模板DNA 模板不纯 纯化模板或使用试剂盒提取DNA 耐热聚合酶 酶量过多 以0.5U为间隔适当减少酶量 Mg2+浓度 Mg2+浓度过高 适当降低Mg2+浓度,从1mM到3mM,间隔0.5mM进行一系列反应,确定对于每个模板和引物对的最佳镁离...

  • [分子生物学] PCR反应常见问题汇总 日期:2010-05-29 14:36:13 点击:333 好评:0

    1.PCR产物的电泳检测时间 一般为48h以内,有些最好于当日电泳检测,大于48h后带型不规则甚致消失。 2.假阴性,不出现扩增条带 PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备,②引物的质量与特异性,③酶的质量及, ④PCR循环条件。寻找原因亦应针对上述环节进行分析...

  • [分子生物学] PCR-SSCP的发展现状 日期:2010-05-29 14:32:00 点击:273 好评:0

    随着分子生物学技术的发展,检测基因结构和突变的方法不断涌现.尤其是PCR技术问世以后,各种与PCR相结合的基因检测技术进一步推动了基因研究的发展.如不对称 PCR产物的直接测序、核糖核酸酶酶切法(Ribonuclease cleavage,RNAase)、限制性 片段长度多态性分析...

  • [分子生物学] 一些特殊组织的RNA提取 日期:2010-05-29 14:25:04 点击:256 好评:0

    1、纤维组织:心脏/骨骼肌等纤维组织提取RNA的关键在于彻底破碎组织。这些组织细胞密度低,单位重量的组织RNA的含量就少,建议用尽可能多的起始量。使用TRNzol法可以提取纤维组织终RNA,由于纤维组织终RNA含量较少,可按照增加的起始量成比例增加TRNzol的用...

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