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2013版ASCO?CAP HER2检测指南

2014-11-14365必发娱乐:丁香园 阅读: 【字号:
导读: 日前,美国病理学家协会 (CAP,College of American Pathologists) 公布了最新版的HER2 检测指南推荐,文献发表于 2014 年近期的 Arch Pathol Lab Med 杂志在线版。本文整理归纳了其中的关键推荐,以飨读者。 主题 2007年推荐 2013年推荐 待测标本 所有原发乳
日前,美国病理学家协会 (CAP,College of American Pathologists) 公布了最新版的 HER2 检测指南推荐,文献发表于 2014 年近期的 Arch Pathol Lab Med 杂志在线版。本文整理归纳了其中的关键推荐,以飨读者。

主题

2007年推荐

2013年推荐

待测标本

所有原发乳腺癌标本和转移灶标本中至少应有一例接受HER2检测

所有新诊乳腺癌患者均必须行HER2检测。如果可获得相应组织样本,随后发展为转移性疾病的患者应进行转移灶HER2检测。

HER2最优检测方案

HER2阳性的标准为IHC HER2 3+(定义为> 30%的侵袭性肿瘤细胞有均匀的强膜染色)或FISH扩增(定义为HER2与CEP17的比值> 2.2或HER2基因平均拷贝数或在此检测系统中不使用内部参照探针时信号/核的比值大于6)

出现以下结果时必须报告HER2检测结果为阳性:

IHC 3+ 且周向膜染色完整、强烈

单探针平均HER2拷贝数 ≥6.0信号因子/细胞

双探针HER2/CEP17比≥2.0;且平均HER2基因拷贝数≥4.0信号/细胞

双探针HER2/CEP17比≥2.0;且平均HER2基因拷贝数≥4.0信号/细胞

双探针HER2/CEP17比<2;且平均基因拷贝数≥6信号因子/细胞

 

HER2阳性疑似定义为:

当检测体系无内部参照探针时,IHC 2+或FISH HER2/CEP17比值为1.8—2.2或平均HER2基因拷贝数为4—6HER2信号因子/细胞

 

当HER2检测结果出现如下结果时必须报告存疑或需重检(相同的样品,不同的检测方法)或重新检测(如果可行则利用新样品、同样的检测方法或新的检测方法):

>10%的侵袭性肿瘤细胞出现IHC 2+且周向膜染色不完整或/和染色弱或一般

或膜染色强且完整的侵袭性肿瘤细胞数量≤10%

以下情形属ISH疑似:

单探针原位杂交HER2平均拷贝数≥4和<6信号因子/细胞

双探针HER2/CEP17比小于2且平均HER2拷贝数≥4和<6信号因子/细胞

 

HER2阴性定义为:

IHC HER20:无染色

IHC HER21+:染色弱不完整

所有部位的肿瘤细胞膜染色均不完整且染色弱,或<10%的细胞膜染色完整但染色弱

 

若检测体系无内参探针,FISH HER2/CEP17比率<1.8或平均HER2基因拷贝数<4信号因子/细胞

若一次检测(或两次)的HER2检测结果出现如下情形时则必须报告为阴性:

IHC 1+定义为>10%的侵袭性肿瘤细胞出现微弱的/几乎察觉不到的不完整膜染色

IHC 0定义为在≤10%的侵袭性肿瘤细胞中观察不到染色或膜染色不完整或几乎察觉不到

基于以下情形判断ISH为阴性:

单探针平均HER2基因拷贝数 <4.0信号因子/细胞

双探针HER2/CEP17比值小于2,且平均HER2拷贝数小于4信号因子/细胞

 

HER2不明确

出现以下情形则必须报告HER2检测不明确,避免组织经一种或两种检测(IHC和FISH)后报告为阴性、阳性或疑似

可能的情况包括:

标本处理不恰当

结果不典型或出现边缘效应,难以解释

分析检测失败

要求对另一标本进行检测以确定HER2状态。检测结果不明确的原因应在报告评论部分加以说明

ISH不合格标准

出现如下情况则认为检测不合格且不应重复:

控制(参照)未达到预期

观察者不能找到至少两个侵袭性细胞的区域视野

超过25%的信号因太微弱而不能判定

超过10%的信号出现在细胞质

核分辨率较差

自发荧光太强

与前版相同,报告HER2试验结果为不明确,且在报告中说明以上所述参数

 

ISH解读

在至少计数20个细胞的基础上解读,病理学家必须确认计数侵袭性肿瘤所须遵循的准则

病理学家须扫描整个切片然后计数20个细胞,或使用免疫组化来定义潜在的HER2扩增

若还有另一细胞群体呈现HER信号/细胞数目比值增多,且该细胞群超过切片肿瘤细胞总数的10%(定义为ISH和IHC切片内成像分析和视野内分析),还需要对该细胞群的至少20个细胞作另次计数并报告

对于明场ISH,计数要求比较正常乳腺细胞和乳腺癌细胞两种细胞模式,因为人工方式很难解读,如果肿瘤细胞模式既非正常也不能明确扩增,则应提交专家判断

可接受的ISH和IHC检测

 

应优先选用FDA批准的IHC、明场ISH、或FISH方案

IHC不合格标准

出现如下情形时则判为检测不合格并重复或使用FISH检测

对照未达预期

大部分样本有人工污染

样本正常的乳腺组织(对照)有强膜染色

相同

IHC解读标准

HER2阳性结果要求> 30%的侵袭性肿瘤细胞有均匀的暗环染色

多种合理方法的解读结果应一致

需超过10%的肿瘤细胞显示均匀的暗环模式才能解读IHC检测结果为3+HER2阳性

 

所有检测方案的报告要求

报告必须包含指南中所指出的所有要素

除补充数据9和10外其他均一样

最佳组织处理要求

从组织采集到固定的时间应尽量缩短,供HER2检测的样本应由10%中性福尔马林缓冲液固定6—48个小时;细胞学检测标本必须固定在福尔马林溶液中

样本切片厚度应在5毫米到10毫米之间,并放置在足够的福尔马林溶液中

固定时间从6—48小时延长为6—72小时。 任何例外的处理过程都应在报告中说明

最佳组织切片要求

超过6周的切片不宜再用,视初始固定方法和储存条件而定

相同

最佳内部验证程序

在进行检测之前需进行验证

相同

最佳初始检测验证

初始检测验证要求25—100样本(在同一实验室用替代性方法进行,或在另一实验室验证)

实验室进行上述验证试验应遵循所有的认证要求,其中包括初始检测验证。实验室初步验证应确保符合2010年版ASCO/CAP推荐之对ER和PgR进行IHC检测的要求,FDA批准的方案应有至少20例阳性样本和20例阴性样本,而 LDTs则要求至少有40例阳性样本和40例阴性样本。以上要求不适用于2007版 ASCO/CAP HER2检测验证的方案,以及外部常规HER2检测,如CAP提供的方案

不同方案检测一致性的最佳监测

必须在检测开始前进行一致性验证,并选取最佳方案。对于任何一种检测方案,如果一致性低于95%(无论是FISH还是IHC),在给出最终结果解读之前必须进行替代性方案的检验

参见下文

最佳内部控制程序

 

应对每一批次和每一个检测审查并记录外部和内部对照

 

持续的质量控制和设备维护

相同

 

初始和此后的实验室人员培训和能力评估

相同

 

使用标准化操作程序(包括对照材料的常规使用)

相同

 

若有变化则需要重新验证

相同

 

病理学家应进行持续的能力评估和培训

应将能力评估和实验室行为纳入实验室记录

最佳实验室验证

每年自检,每隔一年进行一次现场检查

审查项目包括实验室验证、程序、检测结果与过程、结果和报告

若实验室HER2检测结果不满意,则暂停此种方法的检测


(必发365娱乐:admin)
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