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化学发光法和ELISA法检测乙肝病毒五项指标结果比较

2011-05-12365必发娱乐:互联网 阅读: 【字号:
导读: 目的:比较化学发光免疫测定(CL)与酶联免疫吸附试验(ELISA)两种方法检测乙肝病毒标志物的优缺点。方法:用上述两种方法对乙型肝炎病毒五项标志物分别进行检测,然后进行结果分析。结果:化学发光法检测乙型肝炎表面抗原和核心抗体,与ELISA法比较有统计学

郑黎明(贵航平坝医院检验科   平坝   561100)

[摘要]目的:比较化学发光免疫测定(CL)与酶联免疫吸附试验(ELISA)两种方法检测乙肝病毒标志物的优缺点。方法:用上述两种方法对乙型肝炎病毒五项标志物分别进行检测,然后进行结果分析。结果:化学发光法检测乙型肝炎表面抗原和核心抗体,与ELISA法比较有统计学意义(χ2分别为4.604和5.952,P<0.05),而对表面抗体、e抗原及e抗体的检测与ELISA法比较无统计学意义(χ2 分别为0.321,0.985和0.180 ,P>0.05)。结论:化学发光法检测乙肝标志物较ELISA法准确、可靠,少见模式出现几率较小。

【关键词】 化学发光法;酶联免疫吸附试验;乙肝标志物;比较

我国在世界上属于乙型肝炎病毒感染的高发区,根据流行病学调查,人群发生率较高,表面抗原携带率约为15%[1]。目前临床上对乙肝病毒血清标志物的检测普遍采用设备简单、易于开展的ELISA法。随着化学发光技术的发展,其在免疫学检验方面的应用日益受到人们的重视,该法具有高灵敏度、宽线性、反应快速,影响因素少,结果准确等优点。本文就ELISA法、化学发光法两法检测乙肝五项的一致性及各自的优缺点进行了比较,现报道如下。

1  材料与方法

1.1 标本来源 所有标本均来自我院门诊和住院病人,收集用ELISA法检测结果为乙肝表面抗原(HBsAg)、乙肝表面抗体(HBsAb)、乙肝e抗原(HBeAg)、乙肝e抗体(HBeAb)以及乙肝核心抗体(HBcAb)阳性和阴性样本各50例。

1.2  仪器   MA-96A型酶标仪(深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司生产);KPS-KM型化学发光仪(北京科美东雅生物技术有限公司生产)。

1.3 试剂  乙肝标志物酶法检测试剂由上海科华生物工程股份有限公司提供,批号20080810;化学发光法为北京科美东雅生物技术有限公司提供的配套试剂,批号20081208。

1.4 方法 对上述标本分别用ELISA法和化学发光法进行检测,均严格按照各自的试剂盒说明书操作。

1.5 数据处理  使用SPSS13.0统计软件对两种方法检测结果进行χ 2检验。

2 结果

两种方法对乙型肝炎病毒标志物的对比检测结果见表1。从表1可见,100例ELISA法检测 HBsAg的标本用化学发光法分析有65例为阳性,35例则为阴性,两种方法对HbsAg的阳性检出率相比有统计学意义(χ2=4.604,P<0.05);而ELISA法100例核心抗体标本用化学发光法检测有67例为阳性,33例为阴性,阳性率后者高于前者,两者相比有统计学意义(χ2=5.952,P<0.05)。对于HBsAb、HBeAg和HBeAb等项目,两种方法检测结果均无统计学意义(χ2 分别为0.321,0.985,0.180 ,P>0.05)。

 

表1  化学发光法和ELISA法测定乙肝病毒五项标志物结果

方法类型

HBsAg

 

HBsAb

 

HBeAg

 

HBeAb

 

 

HBcAb

 

阳性(阳性率)

阴性

 

阳性(阳性率)

阴性

 

阳性(阳性率)

阴性

 

阳性(阳性率)

阴性

 

阳性(阳性率)

阴性

发光法

65(65%)

35

 

54(54%)

46

 

43(43%)

57

 

47(47%)

53

 

67(67%)

33

ELISA法

50

50

 

50

50

 

50

50

 

50

50

 

50

50

χ2

4.604

 

0.321

 

0.985

 

0.18

 

5.952

P

<0.05

 

>0.05

 

>0.05

 

>0.05

 

<0.05

 3. 讨 论

目前国内最常用酶联免疫吸附试验(ELISA)对乙型肝炎病毒(HBV)两对半定性测定,以此作为是临床分析和判断患者传染性的重要依据之一[2]。与放射免疫技术相比,其最大优势在于该法避免了对环境和人体的危害;操作简便并且试剂有效期较长。但其灵敏度 重复性不及发光法,易造成漏检和假阳性,再加上酶的纯度和反应过程容易受环境因素影响而导致结果稳定性不好。

我们对在ELISA法为阴性的部分样本中,用化学发光法进行检测,表明其为低浓度样本。因此,通过化学发光法检测可以减少其漏检,这对一些低浓度HBsAg携带者,特别是一些群体如医务工作者及病人家属等的检测,做好早期预防有重要的现实意义。在ELISA法为阳性而化学发光法为阴性样本,对其两队半模式进行追踪,表明为少见模式。郑怀竞[3]报道:卫生部临床检验中心用l9个厂家的试剂同时检验106份血样本时,少见模式平均检出率约 4.5%。经证实这些少见模式的报告,均属错误的。而王巧莲[4]报道,ELISA法为少见模式的样本用发光法绝大部分变为常见模式,认为是标本处理不当致溶血或样本本身的原因(如脂血和黄疸等)的致假阳性。由此可见化学发光法可以减少少见模式的发生,降低阳性率。就核心抗体而言,发光法阳性率明显高于ELISA法,除了方法学上的差异外,影响结果的可能性因素还与ELISA法的试剂厂家有意调低了核心抗体的阳性率和发光法直接用原血清,不稀释标本有关。

综上所述,化学发光标记技术是新的方法非放射性免疫分析的一种。用化学发光法检测乙肝两对半具有灵敏度高,重复性好,特异性强,准确性佳,检测快速,无放射性 危害等优点[5],对于可疑的低值血清 、少见模式的检测更具优势,应积极推广使用,以便让医能够对乙肝患者的病程、治疗、预后和病情疗效作出合理的解释提供依据。

 参考文献 

【1】陈慧英,张锦锋,岑小鹏,等.ELISA检测乙型肝炎HBsAg室内质控血清的试剂和使用[J].上海医学检验杂志,2000,15(4):203~205.

【2】孙南雄,黄诅瑚,刘雁雁,等.乙型肝炎患者 957例血清学标志分析[J].中华医学检验杂志,1999,22(5):296.

【3】郑怀竞.乙型肝炎病毒与血清标志物[J].肝病杂志,1993,1(3):181.

【4】王巧莲.化学发光法与ELISA法检测乙肝病毒血清标志物结果比较[J].包头医学院学报,2006,22(1):82-84.

【5】张丽民.化学发光标记及发光免疫分析 [J].基础医学与临床,1995,15(4):201

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